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作者：董苏洁;孔宁;秦文珍;翟焕杰;翟雪滢;杨心雨;童武;郑浩;于海;童光志;李有文;单同领;
单位：塔里木大学动物科学与技术学院;中国农业科学院上海兽医研究所;
摘要：为了建立高效、灵敏的猪流行性腹泻病毒(PEDV)检测方法，本研究从GenBank数据库中获取PEDV N基因序列，扩增出PEDV N基因标准质粒，并在N基因的保守区域内设计了一对特异性荧光定量引物，成功建立了SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法。经过一系列试验表明，该检测方法线性关系良好，R~2值为0.99；特异性强，敏感性高，最低可检测至2.23 copies/μL，比普通PCR灵敏约100倍；重复性好，组内变异系数为0.25%～0.43%，组间变异系数为0.67%～0.97%；对于各地区96份临床样品检测出PEDV阳性率为25%。本研究建立的实时荧光定量PCR检测方法为PEDV的临床诊断、流行病学调查以及定量研究提供了有效的检测工具。
关键词：猪流行性腹泻病毒;;N基因;;SYBR Green I;;荧光定量PCR
基金资助：国家自然科学基金(31872478,32102665,31760741);; 上海自然科学基金(19ZR1469100)
