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中国兽医科学2026年第04期:波斯锐缘蜱HSPC1和HSPC4基因的全长克隆及生物信息学和差异表达分析

来源:期刊VIP网 时间:


作者:刘怡蒙;张国雪;程天印;刘国华;刘磊;段德勇;

单位:湖南农业大学动物医学院;

摘要:为获得波斯锐缘蜱HSPC1(ApHSPC1)和HSPC4(ApHSPC4)基因的全长序列,分析其生物信息学特征和差异表达水平,本研究采用RACE技术扩增其3′端和5′端缺失序列;测序拼接获得全长cDNA;生物信息学软件分析两基因及编码蛋白特征,并构建系统进化树;qPCR检测两基因在波斯锐缘蜱(Argas persicus)不同发育阶段、不同组织中的相对表达量。结果显示,ApHSPC1和ApHSPC4基因全长分别为2 430 bp、2 637 bp,开放阅读框(ORF)为2 178 bp和2 370 bp,编码蛋白均无信号肽,分别具有胞质定位基序MEEVD和内质网定位基序HDEL。相似性与进化树结果显示,两基因均与图卡钝缘蜱(Ornithodoros turicata)热休克蛋白90(HSP90)基因相似性较高、亲缘关系较近。qPCR结果显示,ApHSPC1在不同发育阶段波斯锐缘蜱中的表达量均高于ApHSPC4基因(P<0.001)。饥饿状态下,ApHSPC1在卵巢、中肠、唾液腺内的表达量均显著高于ApHSPC4(P<0.001);饱血后,ApHSPC1在卵巢和中肠内的表达量显著高于ApHSPC4(P<0.001),而在唾液腺中两者表达量无显著性差异(P>0.05)。Ap HSPC1在卵巢中的表达量显著高于精巢(P<0.001),Ap HSPC4则相反(P<0.001)。结果表明,ApHSPC1和Ap HSPC4基因编码蛋白的定位基序不同,且在不同发育阶段、不同组织中的表达水平存在差异,提示ApHSPC1和ApHSPC4可能在波斯锐缘蜱发育、血餐消化、繁殖等生理过程中发挥不同作用。

关键词:蜱;;热休克蛋白90;;RACE扩增;;基因全长;;生物信息学;;表达

基金资助:湖南省自然科学基金面上项目(2025JJ50143);; 长沙市自然科学基金项目(kq2502005);; 国家重点研发计划项目(2024YFD1800103);; 国家自然科学基金青年项目(31902294)