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作者：蒋乐凡;刘权;赵成龙;陈兴祥;
单位：南京农业大学动物医学院;南京瀚星信息科技有限公司;
摘要：IL-31通过与其受体结合，在多种皮肤炎症过程中发挥关键生物学作用。本研究通过构建犬IL-31蛋白原核表达载体，利用大肠杆菌表达系统成功表达后纯化出高纯度的重组犬IL-31蛋白。以该重组蛋白免疫BALB/c小鼠，通过3次免疫、细胞融合与有限稀释法筛选，成功获得1株可稳定分泌抗犬IL-31单克隆抗体的杂交瘤细胞株1F2，其抗体亚型为Ig G1/λ，纯化后的抗体效价可达1∶13 107 200。为进一步验证抗体的特异性，构建真核表达质粒并在HEK-293T细胞中表达犬IL-31。Western-blot结果表明，1F2单克隆抗体能够特异性识别真核系统中表达的犬IL-31蛋白，表明有良好的反应特异性。本研究成功制备的抗犬IL-31单克隆抗体1F2，为后续开发针对犬IL-31的治疗性抗体及相关检测方法的建立奠定了基础。
关键词：犬IL-31;;原核表达;;单克隆抗体
基金资助：国家重点研发计划项目（2023YFD1800302）;; 国家自然科学基金面上项目（32273081）
