来源:期刊VIP网 时间:
作者:张紫薇;马佳镁;黄春媛;于娜;郑佳馨;张艳;刘光亮;曹宗喜;
单位:海南省农业科学院畜牧兽医研究所海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室/国家动物疫病数据中心海口观测实验点;海南省农业科学院三亚研究院(海南省实验动物研究中心);新疆农业大学动物医学学院;苏州天隆生物科技有限公司;塔里木大学动物科学与技术学院新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室;
摘要:猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是危害全球养猪业最重要的疾病之一,给世界范围内的养猪业带来了重大的经济损失。临床上快速、准确地检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是PRRS防控的关键因素。本研究建立了一种基于逆转录重组酶介导扩增结合侧流层析试纸条技术(RT-RAA-LF)的检测PRRSV的方法。该方法通过针对PRRSV ORF7基因序列设计特异性引物和探针。RT-RAA-LF检测可在39 ℃下用引物和探针扩增10 min,通过侧流层析试纸条在3 min内用肉眼观察结果。该方法具有较高的灵敏度,最低检测限为10~1 copies/??L,具有较强的特异性,与其他猪病原体无交叉反应,可操作性强。使用RT-RAA-LF和常规PCR检测157份样品,RT-RAA-LF与常规PCR方法的一致性为χ~2<3.84,符合率97.8%。上述结果表明,该研究成功建立了一种RT-RAA-LF检测方法,为PRRSV的快速和直观检测提供了新的方法。
关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒;;RAA;;ORF7;;侧流层析试纸条;;快速检测
基金资助:国家自然科学基金项目(32060796);; 海南省重点研发项目(ZDYF2023XDNY038);; 国家重点研发计划(2021YFA0805905,2023YFC3404302);; 海南省重大科技计划项目(ZDKJ2021030)