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作者：储林宏;史文倩;龚静芝;白邵缘;周国庆;黄思扬;
单位：扬州大学兽医学院比较医学研究院江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室;
摘要：弓形虫是一种顶复门胞内寄生虫，可感染包括人类在内的大多数温血动物。猫作为弓形虫的终末宿主在传播弓形虫病的过程中起了关键性作用。为此，猫的弓形虫病检测显得至关重要。本试验选取弓形虫MIC17A(TgMIC17A)，构建pET-28a-MIC17A重组质粒，对重组蛋白MIC17A进行诱导表达并通过镍柱纯化，Western blot分析其免疫反应性，将其与实验室前期筛选的ALD混合作为诊断抗原，建立以MIC17A和ALD两种抗原为抗原的猫弓形虫病间接ELISA方法(MIC17A+ALD iELISA)。通过棋盘法确定抗原最佳包被浓度和血清稀释度，并对反应条件进行优化。该方法敏感性和特异性分别可达75%和100%，重复性良好。利用该方法与MAT同时检测100份猫田间血清样本，最终检测结果与微量凝集试验符合率高达97%。本研究成功建立了一种同时具备高敏感性和高特异性的猫弓形虫病间接ELISA方法，为猫弓形虫病的检测提供了技术支撑。
关键词：弓形虫;;MIC17A;;果糖1,6-二磷酸醛缩酶;;间接ELISA
基金资助：江苏省杰出青年基金(BK2019046);; 江苏高校优势学科建设工程资助项目
