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中国动物传染病学报2025年第06期:羊口疮病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用

来源:期刊VIP网 时间:


作者:李蓉;丹增;富国文;班旦;格桑卓嘎;四朗玉珍;樊月圆;

单位:云南农业大学动物医学院;西藏那曲市尼玛县农牧业科学技术服务站;西藏自治区农牧科学院畜牧兽医研究所;

摘要:为了构建一种适用于检测羊口疮病毒临床组织样品及常规病原的检测方法。根据羊口疮病毒B2L基因CDS区设计普通PCR引物、荧光PCR引物及探针,通过建立标准曲线、检测灵敏度、检测特异性以及重复性试验,以及对临床样品进行验证。结果表明ORFV能发生特异性扩增,对GTPV、PPRV、BVDV、BTV、FMDV、鸡痘、金黄色葡萄球菌等无扩增反应,特异性较好,重复性结果显示CV值小于2%,最低扩增浓度为3.92×10~1 copies/μL。对94份疑似感染羊口疮组织样品进行检测,结果显示阳性率为78.74%(62/94)。本研究所构建的ORFV TaqMan实时荧光定量PCR检测技术可以迅速准确检测出ORFV病毒,可以为羊口疮的防治和后续研究提供重要的基础数据支持。

关键词:羊口疮病毒;;TaqMan探针法;;实时荧光定量PCR

基金资助:西藏自治区“十四五”重大科技专项(XZ202101ZD0001N)