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作者：孟菲菲;张颖;廖佳怡;徐诗雨;胡佳红;梁文静;冯紫盈;张志榜;张晓燕;杨涛涛;李凯;郭敏红;李鹏成;
单位：宜春学院生命科学与资源环境学院/动物病原微生物实验室;
摘要：旨在制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白单克隆抗体(mAb)及解析其抗原表位。本研究以原核表达的重组蛋白His-GFP-N为抗原免疫BALB/c鼠，利用间接ELISA筛选获得1株分泌N蛋白抗体的杂交瘤细胞(1F8)。mAb 1F8的亚类为IgG1，轻链是κ链，腹水ELISA效价为1∶10~9。IFA显示mAb 1F8能特异性识别PRRSV，Western blot试验表明该mAb能与Ⅰ型和Ⅱ型PRRSV N蛋白发生反应。通过对逐步截短表达的N蛋白进行Western blot鉴定，最终确定mAb 1F8识别的核心抗原表位为~(52)KPH~(54)，是一个超短且高度保守抗原表位。本研究为后续研究提供了必要的抗体试剂，也证明了B细胞抗原表位可以短至3个氨基酸。
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒;;N蛋白;;单克隆抗体;;抗原表位
基金资助：国家自然科学基金(32260880);; 江苏省现代农业产业技术体系(JXARS-10);; 新余市科技支撑计划(余科发[2023]32号);余科发[2025]33号
