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作者：杨贝妮;张漫;董春娜;肖进;张蕾;王自力;
单位：浙江大学,动物科学学院;中牧实业股份有限公司,农业部兽用生物制品与化药重点实验室,北京市兽用多肽疫苗设计与制备工程技术中心;浙江大学,动物医学中心;
摘要：为了建立一种能够检测猫泛白细胞减少症病毒（Feline panleukopenia virus, FPV）的双抗体夹心酶联检测（ELISA）方法，本研究首先构建了FPV VP2蛋白的原核表达载体并进行了VP2蛋白的原核表达。经SDS-PAGE实验验证及反应原性检测后，以VP2重组蛋白作为免疫原，通过间接ELISA方法筛选出2株能特异性识别VP2蛋白的高亲和力单克隆抗体，分别命名为2F10和3D2。通过对捕获抗体包被浓度、酶标检测抗体使用浓度等最适反应条件进行摸索，建立了FPV的双抗体夹心ELISA检测方法，并对方法的敏感性、特异性及与PCR方法的符合率进行验证。结果显示该方法的最低检测限为10~(3.2) TCID_50/mL，高于市售商品化试纸条，且与猫杯状病毒（Feline calici virus,FCV）和猫疱疹病毒1型（Feline herpesvirus type 1, FHV-Ι）均无交叉反应，特异性较好，与FPV标准检测方法 PCR的符合率为98.9%，且操作简便、检测快速，为FPV的检测提供了一种有效的工具，为进一步开发FPV检测试剂盒奠定了基础。
关键词：猫泛白细胞减少症病毒;VP2蛋白;单克隆抗体;双抗体夹心ELISA
基金资助：2024年北京市博士后科研活动经费（京人社专技字[2024]68号）,题目：猫泛白细胞减少症病毒胶体金抗原检测试纸条的研制~~
