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作者：梁浩;孙海;邵财;周季欣;吕柏辰;朱家鹏;张亚玉;
单位：中国农业科学院特产研究所;成都大学食品与生物工程学院;
摘要：目的：克隆人参Panax ginseng独脚金内酯酶基因PgSL并进行生物信息学分析，确定PgSL基因在缺氮、缺磷及独脚金内酯类似物GR24处理下的表达水平。方法：根据高通量测序获得人参PgSL基因CDS序列，利用同源重组和golden gate无缝克隆的方法，扩增PgSL基因CDS序列，并将其编码的氨基酸序列提交至NCBI、Protparam、SOPMA等网站和软件进行生物信息学分析；利用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测缺氮、缺磷及外源GR24处理下人参根部组织中PgSL基因的表达水平。结果：人参PgSL基因的CDS序列为816 bp,编码271个氨基酸；PgSL蛋白属于MhpC家族蛋白，该蛋白相对稳定，属于疏水性蛋白，α螺旋为主要组成部分；PgSL蛋白与琐氏独活Heracleum sosnowskyi、核桃树Juglans regia、木本棉Gossypium arboreum中的独脚金内酯酶具有较近的系统发育关系；与对照组相比，缺氮处理下PgSL基因的表达量升高，当施用外源GR24后，PgSL基因的表达量降低；缺磷处理下PgSL基因的表达量无显著变化，当施用外源GR24后，PgSL基因的表达量上升；同时缺氮缺磷处理下PgSL基因的表达量降低，当施用外源GR24后，PgSL基因的表达量升高。结论：克隆获得PgSL基因的CDS序列及表达信息，可为后续进行基因功能研究和人参栽培的氮磷营养调控提供参考。
关键词：人参;;独脚金内酯;;氮和磷;;基因表达分析
基金资助：国家现代农业产业技术体系项目(CARS-21);; 中国农业科学院科技创新工程项目(CAAS-ASTIP-2021-ISAPS)
