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中药材2024年第06期:丹参酮Ⅱ_A磺酸钠注射液调控mTOR/HIF-1α介导的自噬减轻H9C2细胞缺氧/复氧损伤

来源:期刊VIP网 时间:


作者:史苏娜;贾相科;刘欢欢;侯维娜;王秀玲;郭自力;

单位:邢台市第三医院/邢台市心血管病医院;

摘要:目的:探究丹参酮Ⅱ_A磺酸钠注射液通过调控哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/缺氧诱导因子-1α(mTOR/HIF-1α)介导的自噬对H9C2细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的影响。方法:H9C2细胞分为空白对照组、模型组、雷帕霉素(RAPA,mTOR抑制剂,10μmol/L)组及丹参酮Ⅱ_A磺酸钠注射液低(10μmol/L)、中(20μmol/L)、高(40μmol/L)浓度组。将H9C2细胞缺氧6 h再复氧12 h,构建细胞H/R损伤模型。造模前,各给药组细胞培养基中加入相应药物常规培养3 h。空白对照组始终常规培养。培养结束后,CCK-8实验检测细胞活力、试剂盒检测LDH释放;DHE、DCFH-DA荧光检测ROS生成;Hoechst 33258、Annexin V-FITC染色检测细胞凋亡;透射电镜观察细胞自噬小体形成;Western Blot检测细胞LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、P62、HIF-1α、mTOR、p-mTOR蛋白表达。结果:与空白对照组比较,模型组细胞活力显著降低,细胞凋亡率及ROS水平显著升高,自噬小体数量显著增多,细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、HIF-1α蛋白表达显著升高,P62蛋白表达及p-mTOR/mTOR水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,各给药组细胞活力显著升高,细胞凋亡率及ROS水平显著降低,自噬小体数量显著增多,LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、HIF-1α蛋白表达显著升高,P62蛋白表达及p-mTOR/mTOR水平显著降低(P<0.05)。丹参酮Ⅱ_A磺酸钠的作用呈浓度依赖性;而丹参酮Ⅱ_A磺酸钠注射液高浓度组与RAPA组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:丹参酮Ⅱ_A磺酸钠注射液通过调控mTOR/HIF-1α介导的自噬减轻H9C2细胞H/R损伤。

关键词:丹参酮Ⅱ_A磺酸钠注射液;;mTOR/HIF-1α;;缺氧/复氧损伤;;自噬