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作者：王雪;华东宁;周瑾;张岩;邢彩虹;
单位：中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所化学安全与健康重点实验室;
摘要：目的:探究组蛋白甲基转移酶Kmt2c基因杂合缺失对小鼠血液系统的影响。方法:使用CRISPR/Cas9技术构建Kmt2c基因杂合缺失的模型小鼠,血常规连续监测小鼠全血细胞计数的变化;通过体外集落形成实验探究骨髓细胞的克隆性扩增能力;流式细胞术分析突变小鼠体内原始造血细胞群(长期造血干细胞、短期造血干细胞、多能祖细胞)的比例变化。结果:成功构建Kmt2c基因杂合缺失小鼠(Kmt2c~(+/-))模型,其Kmt2c mRNA表达水平是C57BL/6J小鼠的28%。Kmt2c~(+/-)小鼠骨髓细胞体外集落形成能力随着传代次数的增加而增强,并在第四代时集落数显著高于对照组(P <0.05)。Kmt2c~(+/-)小鼠原始造血细胞群中的长期造血干细胞和短期造血干细胞比例分别为19.6%±3.3%及28.9%±4.9%较对照组的16.9%±2.6%及18.9%±2.5%有增高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。Kmt2c~(+/-)小鼠的白细胞计数在监测的第12周后逐渐上升在第14周时为(9.8±1.0)×10~9/L,显著高于对照组的(7.3±1.4)×10~9/L(P <0.05)。结论:Kmt2c~(+/-)小鼠的骨髓细胞具有克隆性扩增的潜能。
关键词：Kmt2c基因;;骨髓细胞;;克隆扩增;;流式细胞术
基金资助：国家自然科学基金项目(82070116)
