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作者：李巨银;葛君;马超;张建辉;闫伟;孙娇娇;李建强;
单位：江苏农牧科技职业学院动物医学院;远大赛威信生命科学(南京)有限公司;
摘要：柯萨奇病毒A组16型(CVA16)是引发手足口病流行与暴发的重要病原体之一，给公共卫生领域带来了严峻挑战。本研究通过体外构建柯萨奇病毒CVA16的eDNA感染性克隆，进而对其感染能力、连续传代稳定性以及体内免疫原性展开深入探究，旨在为CVA16疫苗的研发提供科学依据。本研究利用eGFP报告基因构建CVA16微基因组平台，并通过反向遗传技术拯救出CVA16感染性克隆，对其生物学特性进行全面评估。结果显示：构建的CVA16全长cDNA质粒经限制性内切酶双酶切，获得7500 bp目的条带和3500 bp载体条带，全基因测序验证cDNA序列与理论序列完全一致；细胞形态学鉴定显示，CVA16组可见典型肠道病毒致细胞病变效应，连续传代后仍保持稳定感染性及正常噬斑形态；小鼠免疫实验表明，该克隆可诱导机体产生高滴度特异性抗体和中和抗体，超离浓缩后中和抗体滴度为原液免疫组的2倍。结果表明，通过反向遗传技术获得的CVA16感染性克隆在体外可稳定传代，并具有较强的免疫原性，可为病毒基因功能、感染机制及疫苗研发提供基础。
关键词：柯萨奇病毒A组16型;;反向遗传;;感染性克隆;;中和抗体
基金资助：泰州市科技支撑计划(农业)项目(TN202002,NSFZP202204);; 江苏高校“青蓝工程”项目(苏教师函[2022]29号)
