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作者：柴茂;马震原;杨海波;王淑娟;刘影;王东方;赵雪丽;王翠;谢彩华;王华俊;闫若潜;
单位：河南省动物疫病预防控制中心河南省重大动物疫病监测预警及防控重点实验室;
摘要：利用昆虫杆状病毒表达系统(BEVS)表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白，并制备单克隆抗体。构建PEDV N基因重组穿梭质粒pFastBac-N，转化至感受态细胞DH10Bac中获取重组杆粒Bacmid-N，将Bacmid-N转染至SF9昆虫细胞中制备重组蛋白。将重组蛋白免疫小鼠，经融合、筛选、纯化出单克隆抗体，并测定单克隆抗体相关特性。获得重组杆状病毒rBV-N，获得大小为59 kDa重组N蛋白(rN)，制备出抗N蛋白单克隆抗体3C8E3，该单克隆抗体为IgG1亚类，效价为1∶1.024×10~5，效价高、特异性强、稳定性好，更具实用性。本研究为PEDV抗原/抗体诊断试剂盒、PEDV亚单位疫苗研究奠定了基础。
关键词：昆虫杆状病毒表达系统;;猪流行腹泻病毒;;单克隆抗体
基金资助：2022年度河南省重点研发与推广专项(222102110227,222102110121,222102110289);; 2022年度河南省重大科技专项(221100110600);; 河南省现代农业产业技术体系(HARS-22-12-T);; 河南省重点研发专项(231111111300)
