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作者:陈赫威;杨清;曹佳媛;韦珊珊;陆晨阳;林俊;覃绍敏;陈凤莲;吴健敏;陈樱;马玲;
单位:广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室农业农村部中国(广西)-东盟跨境动物疫病防控重点实验室;广西大学动物科学技术学院;南宁市动物园;
摘要:阿卡斑病毒(AKAV)是一种主要感染牛羊的虫媒病毒,近年来在我国流行日趋复杂。为了建立一种更加灵敏、可以同时检测多种动物AKAV抗体的方法,本研究以重组AKAV N蛋白和HRP标记的重组AKAV N蛋白分别为捕获抗原和检测抗原,通过优化反应条件,首次成功建立检测AKAV抗体的双抗原夹心化学发光酶免疫分析法。该方法与蓝舌病毒、鹿流行性出血热病毒、牛肠道病毒和猪伪狂犬病毒阳性血清均无交叉反应;批内、批间重复性试验变异系数均小于8%,重复性好;与AKAV阻断ELISA试剂盒相比,敏感性高32倍,检测时间缩短42 min,检测结果κ系数为0.826,符合率极高;通过中和试验验证其准确性高。本研究建立的AKAV抗体检测化学发光酶免疫分析法特异性强、敏感性高、重复性好、简便、快速、准确,为AKAV大规模样品监测、血清学调查、疫病防控提供有效的技术手段。
关键词:阿卡斑病毒;;N蛋白;;双抗原夹心CLEIA
基金资助:国家自然科学基金资助项目(32160830);; 广西壮族自治区兽医研究所基本科研业务费专项资助项目(桂科专项24-4);; 广西兽医生物技术重点实验室开放基金资助项目(20-065-23-B-2)