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作者：陈荣琳;邢燕茹;王娟;李健楠;高硕磊;刘清艳;祝宇翔;周艳君;单同领;童武;郑浩;刘长龙;姜一峰;孔宁;童光志;于海;
单位：中国农业科学院上海兽医研究所;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;
摘要：本研究以Madin-Darby犬肾(MDCK)细胞作为培养基质扩增猪流感病毒，并选择甲醛和β-丙内酯(BPL)两种化学灭活剂对病毒灭活。这两种灭活试剂最佳灭活条件为0.1%甲醛终浓度及37 ℃灭活24 h，以及0.02%BPL终浓度及4 ℃灭活18 h，灭活后抗原血凝效价比原始病毒低1个滴度左右。在不同灭活剂基础上分别配伍油佐剂ISA 201 VG和水佐剂HA 208乳化，在BALB/c小鼠上对灭活疫苗进行免疫评估及攻毒保护评价，攻毒使用剂量为1×10~6 TCID_(50)/只。甲醛灭活苗相比BPL灭活苗更能刺激小鼠产生高水平的HI抗体，佐剂选用油佐剂ISA 201 VG相比水佐剂HA 208所产生的HI抗体效价更高。攻毒后疫苗免疫组的存活率均达到100%，与对照组相比免疫组肺脏样品中病毒含量明显减少。据以上试验结果，初步认为甲醛+ISA 201 VG佐剂灭活苗对BALB/c小鼠所产生的免疫效果最佳并能较好地抵抗欧亚类禽猪流感病毒的攻击。以上研究结果为后续猪流感全病毒灭活疫苗的设计以及病毒灭活生产工艺提供了一定的研究基础。
关键词：欧亚类禽H1N1;;甲醛;;BPL;;全病毒灭活疫苗;;免疫效力评价
基金资助：国家重点研发计划项目课题(2022YFD1800803);; 国家自然科学基金面上项目(31970175);; 中国农业科学院创新工程“猪病毒性繁殖障碍疫病防控技术团队”项目
