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中国动物传染病学报2025年第02期:猪德尔塔冠状病毒截短S1蛋白原核表达与多克隆抗体制备

来源:期刊VIP网 时间:


作者:叶曼青;叶晨倩;秦文珍;杨心雨;翟雪滢;郑浩;童武;李国新;于海;童光志;孔宁;李智丽;单同领;

单位:佛山科学技术学院;中国农业科学院上海兽医研究所;

摘要:自2014年猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)在美国暴发以来,严重危害生猪健康,给各国的经济带来重大压力。本试验拟将PDCoV S1蛋白截短,通过原核表达获得重组蛋白,并且制备对应的多克隆抗体。利用生物信息学软件对PDCoV S1蛋白的亲疏水性进行分析,将其截短为3个相互重叠的基因片段,并通过原核表达获得重组蛋白。以重组蛋白为抗原免疫6周龄雌性BALB/c小鼠制备多克隆抗体。结果显示:截短获得的3个重组蛋白均在包涵体中稳定表达,通过间接ELISA、Western blot和IFA检测方法,表明制备的多克隆抗体具有良好的抗体效价和特异性识别能力。本研究制备出特异性识别PDCoV S蛋白的多克隆抗体,为后续研究PDCoV S蛋白的结构和功能提供了工具,为建立PDCoV诊断方法奠定了基础。

关键词:PDCoV;;S蛋白;;截短蛋白;;原核表达;;多克隆抗体

基金资助:国家自然科学基金(32102665,32272999)