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中国动物传染病学报2025年第02期:猪冠状病毒四重荧光定量PCR检测方法建立

来源:期刊VIP网 时间:


作者:俞赵荣;孙彤;金雪明;孙竹筠;苏苌;刘静宜;刘英楠;陈鸿军;

单位:中国农业科学院上海兽医研究所;中国农业科学院生物安全研究中心;农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(北方);

摘要:为了准确鉴别猪重要冠状病毒的感染,本研究设计特异性引物和TaqMan探针,建立了针对猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)、猪血凝性脑脊髓炎病毒(PHEV)、猪δ-冠状病毒(PDCoV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)的四重荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测方法,并对其特异性、敏感性及重复性进行评估。结果显示:该方法具有良好的扩增特异性,可精准区分上述四种猪冠状病毒;对SADS-CoV、PDCoV和PHEV的最低检测限为10拷贝/μL,对PEDV为100拷贝/μL,敏感性较常规PCR提高了100倍;组内和组内变异系数均<2%,重复性良好。结果表明,该方法为猪冠状病毒感染的鉴别诊断提供了可靠分子检测工具,具有重要的临床应用价值。

关键词:猪急性腹泻综合征冠状病毒;;猪血凝性脑脊髓炎病毒;;猪δ-冠状病毒;;猪流行性腹泻病毒;;荧光定量RT-PCR

基金资助:上海市2020年度“科技创新行动计划”动物研究领域基金项目(20140900300)