来源：期刊VIP网 时间：
作者：蒙琦;常亮;杨明;曹映辉;贺泂杰;
单位：甘肃省畜牧兽医研究所陇东南畜禽病原微生物防控技术研发创新实验室;庄浪县畜牧兽医中心;中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所;
摘要：本研究旨在建立一种检测牛病毒性腹泻病毒的RT-CPA-CRISPR/Cas12a方法。选取BVDV的E0蛋白基因序列为基础，设计CPA特异性引物。同时，依据CRISPR/Cas12a 的设计原则，设计了crRNA靶向RT-RAA扩增产物，并优化了RT-CPA-CRISPR/Cas12a反应体系，此外，借助建立的该方法，开展了临床样品的检测。结果显示：所建立的检测方法对BVDV的最低检出限为8.0 copies/μL，并具有高度特异性，对42份临床样品检测显示，该方法与传统PCR方法的一致性好，符合率能达到92.86%。该研究建立了牛病毒性腹泻病毒的RT-CPA-CRISPR/Cas12a检测方法，为该病的诊断提供了技术手段。
关键词：牛病毒性腹泻病毒;;交叉引物恒温扩增技术;;CRISPR/Cas12a;;灵敏度;;特异性
基金资助：平凉市重点研发计划项目(PL-STK-2023A-037);平凉市重点研发计划项目(PL-STK-2024A-028);; 甘肃省农业农村厅科技计划项目(GNKJ-2022-39);; 甘肃省科技计划项目-重点研发计划(21YF5NA143)
