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作者：乔淑媛;滕巧泱;李雪松;刘芹防;张志飞;王思琪;李泽君;杨健美;王彩云;
单位：内蒙古农业大学兽医学院;中国农业科学院上海兽医研究所;
摘要：目前，H9N2亚型禽流感病毒是我国最主要的低致病性禽流感病毒，造成禽养殖业的严重经济损失。H9N2禽流感病毒灭活疫苗是防控该疫病的最有效方式，然而，H9N2病毒在免疫压力下容易产生抗原变异，导致疫苗免疫失败，其机制尚不清楚。在前期研究中，我们通过模拟H9N2禽流感免疫压力筛选出携带HA_(D201N)单点突变的逃逸株，但HA_(D201N)如何导致H9N2病毒逃逸株出现的原因尚不明确。为此，本研究利用8质粒反向遗传技术方法拯救出1株A/Chicken/Shanghai/1/2006(H9N2)(简称SH1)及其免疫逃逸株rSH1-HA_(D201N)。为了鉴定HA_(D201N)是否通过影响H9N2禽流感病毒复制能力而导致病毒发生免疫逃逸，用0.001 MOI的病毒接种MDCK并测定其生长曲线，结果表明HA_(D201N)点突变可显著降低rSH1病毒的复制能力，且病毒复制能力的变化不是rSH1病毒发生逃逸的主要原因。为了研究HA_(D201N)是否通过影响H9N2病毒抗原变异而产生病毒逃逸株，将原毒株与突变毒株加入佐剂后免疫鸡以制备多克隆抗体血清，利用交叉HI试验，计算R值并分析抗原变异，结果表明rSH1与rSH1-HA_(D201N)的R值为2，说明HA_(D201N)会导致rSH1发生显著的抗原变异，从而使病毒在免疫压力下逃逸。本研究为探索H9N2禽流感病毒抗原变异规律及其疫苗研发奠定了基础。
关键词：H9N2亚型禽流感病毒;;反向遗传技术;;点突变;;免疫逃逸
基金资助：中国农业科学院创新工程基金(CAAS-ASTIP-SHVRI-2014-4);; 国家青年科学基金项目(31700136);; 上海市科技兴农项目(2021-02-08-00-12-F00746);; 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(JB03)
