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作者：秦春雪;夏国建;何成强;
单位：山东省药学科学院新药评价中心山东省生物制药重点实验室;山东师范大学生命科学学院山东省动物抗性重点实验室;
摘要：本研究旨在克隆牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的非结构蛋白NS5B截短基因，采用原核表达系统表达获得截短蛋白，并进一步制备其多克隆抗体。构建的原核表达质粒pET-28a-NS5B转化至BL21感受态细胞，经IPTG诱导后，发现NS5B蛋白以包涵体为主。纯化蛋白免疫小鼠制备的多克隆抗体具有良好的反应性，能够特异性识别真核表达的NS5B蛋白。本研究中NS5B蛋白的截短表达及其多克隆抗体的制备为进一步研究NS5B蛋白的生物学功能，以及建立BVDV鉴别诊断的血清学检测方法奠定了基础。
关键词：牛病毒性腹泻病毒;;NS5B蛋白;;原核表达;;多克隆抗体
基金资助：山东省重点研发项目(2017GNC10125,2019GSF107020)
