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作者:王勤;欧云文;汪洋;潘琴;刘俐君;何博;
单位:达州职业技术学院;开江县动物疫病预防控制中心;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室;达州市动物疫病预防控制中心;
摘要:为了建立一种快速鉴别检测猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪圆环病毒3型(PCV-3)、猪圆环病毒4型(PCV-4)的方法,试验设计合成PCV-2、PCV-3、PCV-4特异性鉴别检测引物,经一步法三重RT-PCR反应条件的优化,建立了PCV-2、PCV-3、PCV-4三重PCR鉴别检测方法。该方法对PCV-2、PCV-3、PCV-4、PCV-2/PCV-3/PCV-4可分别扩增出216、415、678 bp、216 bp/415 bp/678 bp的特异性条带,检测PRV、PPV、PRRSV、CSFV、PEDV、TGEV均为阴性,对PCV-2、PCV-3、PCV-4的最低检测量分别为1.0×10~2、1.0×10~3、1.0×10~3拷贝/μL,与PCV-2、PCV-3、PCV-4单项PCR方法的符合率均为100%,应用该方法检测85份临床病料样品,PCV-2、PCV-3、PCV-4阳性感染率分别为21.17%、14.12%、4.71%。说明建立的PCV-2、PCV-3、PCV-4三重PCR鉴别检测方法具有良好的特异性、敏感性、准确性和临床适用性,为PCV-2、PCV-3、PCV-4的临床鉴别诊断提供一种简便、快速的分子生物学检测技术。
关键词:PCV-2;;PCV-3;;PCV-4;;三重PCR;;鉴别检测
基金资助:四川省科技计划项目(2020JDRC0146);; 甘肃省科技计划项目(20YF3NA005)