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作者：宋若楠;刘春草;李航;王真真;贾楠楠;朱杰;李传峰;程松;梁留存;刘光清;王金泉;孟春春;
单位：新疆农业大学;中国农业科学院上海兽医研究所;德国纳博科临中国检测实验室;
摘要：为获得治疗犬病毒性传染病的特效药物，本研究将铁蛋白与犬α干扰素进行融合表达。首先根据GenBank中公布的犬α干扰素序列(IFN2a)合成模板，通过融合PCR连入铁蛋白编码基因的上游，并将该重组基因克隆至原核表达载体pCold-TF中，获得重组质粒pCold-TF-CaIFN2a-Fe。转化BL21后用异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导，经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)，蛋白免疫印迹(Western blot)鉴定，获得约89 kDa的可溶性重组目的蛋白。重组蛋白经镍柱纯化后，使用犬肾细胞/水疱疹性口炎病毒(MDCK/VSV)微量细胞病变抑制法检测抗病毒活性，效价确定为8×10~4 IU/mg，显示出良好的应用前景。
关键词：铁蛋白;;犬α干扰素;;融合表达;;抗病毒活性
基金资助：中国农业科学院青年英才培育工程专项经费
