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中国动物传染病学报2024年第04期:弓形虫肌动蛋白抗原表位抗体的制备及应用

来源:期刊VIP网 时间:


作者:庄宝灿;朱进进;余莉;

单位:安徽医科大学病原生物学教研室病原生物学安徽省重点实验室人畜共患病安徽高校省级重点实验室;

摘要:制备弓形虫肌动蛋白(TgActin)多肽表位抗体并探讨其应用价值。BepiPred 1.0 Server在线分析设计TgActin抗原表位,并与多种属Actin进行同源比对,选取并合成高特异性多肽片段序列免疫新西兰兔。末次免疫后收集兔血清并使用Protein G纯化抗体,SDS-PAGE检测抗体纯度,ELISA测定抗体效价,Western blot分析抗体的特异性及TgActin表位抗体作为内参抗体的可能性,免疫荧光观察胞内速殖子形态。结果显示,ELISA测定抗体效价为1∶128 000,Western blot结果显示抗体特异性识别弓形虫Actin,免疫荧光染色显示TgActin表位抗体可以标记纳虫泡内速殖子。结果表明,成功制备了TgActin多肽表位抗体,可用做弓形虫蛋白检测的内参抗体及其在细胞内的免疫荧光检测,为后续弓形虫研究提供了便利条件。

关键词:弓形虫;;肌动蛋白;;表位抗体;;内参抗体;;免疫荧光

基金资助:国家自然科学基金(81572022)