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中国动物传染病学报2024年第04期:猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白在昆虫杆状病毒表达系统中的表达与鉴定

来源:期刊VIP网 时间:


作者:黄袁慧;马静;王乃迪;张昕;张莹;兰冰洁;刘玉良;倪建强;周智;李义平;王传彬;

单位:广西大学动物科技学院;中国动物疫病预防控制中心;中山大学中山医学院;

摘要:猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP5蛋白是病毒主要囊膜结构蛋白和中和抗体主要靶蛋白,广泛应用于PRRS新型疫苗和诊断技术的研究。为获得具有与天然构象相近的PRRSV GP5蛋白,本研究根据草地贪夜蛾(Spdopterafrugiperda)密码子偏好性,优化PRRSV ORF5基因编码密码子,并克隆至杆状病毒载体后转染Sf9昆虫细胞,构建了重组杆状病毒rBac-PRRSV-GP5。经Western blot证实GP5蛋白在Sf9细胞中获得高效表达,且具有良好的免疫反应原性。经镍离子亲和层析纯化后,获得高纯度的重组GP5蛋白,为开展PRRSV诊断技术研发、生物学功能研究等奠定了抗原基础。

关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒;;ORF5基因;;GP5蛋白;;表达;;蛋白纯化

基金资助:现代农业产业体系北京市创新团队(BAIC02-2021)