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作者：李梅;杨美;岳筠;王柏林;宋春;朱二鹏;单春兰;文明;程振涛;
单位：贵州大学动物科学学院;贵州省动物疫病预防控制中心;贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室;
摘要：为筛选鸡毒支原体(MG)膜蛋白，利用生物信息学软件对其进行序列分析后，选择不含跨膜区的714 bp基因片段作为靶标蛋白进行原核表达(因其分子量约31 kDa，故而命名为P31蛋白)，表达P31蛋白并进行纯化后制备兔多克隆抗体，运用ELISA方法检测抗体效价，提取MG液体培养物总蛋白、胞浆蛋白、膜蛋白，利用Western blot进行亚细胞定位。结果显示，P31蛋白具有跨膜结构和良好的B细胞抗原表位，原核表达后获取融合蛋白rP31，大小约为31 kDa，ELISA检测兔血清效价为1∶25 600，Western blot分析显示，rP31蛋白分布在MG膜表面。本研究证实了P31蛋白确为MG膜蛋白且抗原性良好，可做为研发MG新型诊断方法、基因工程疫苗及治疗药物的候选蛋白。
关键词：鸡毒支原体;;P31蛋白;;原核表达;;膜定位
基金资助：国家自然科学基金项目(32060786,31660723);; 贵州省科学技术项目(黔科合基础[2019]1181号);; 贵州省科技支撑计划项目(黔科合支撑[2021]一般161);; 贵州省优秀青年科技人才项目(黔科合平台人才[2021]5646)
