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作者：乔思娜;李丽薇;赵款;高飞;周艳君;姜一峰;童武;赵冉;童光志;李国新;董世山;
单位：河北农业大学动物医学院;中国农业科学院上海兽医研究所;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;厦门市动物疫病预防控制中心;
摘要：为了快速、准确检测非洲猪瘟病毒(African swin fever virus,ASFV)，本文根据我国流行毒株ASFV SY18(GenBank ID：MH766894.1)已公布的K205R基因序列设计并合成特异性引物及探针，建立针对K205R基因的TaqMan荧光定量PCR检测方法。经过特异性试验、敏感性试验、重复性试验和临床样品检测试验分析显示，本文建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法Ct值与标准品在1×10~(11)～1×10~2 copies/μL范围内具有很好的线性关系，相关系数为0.998，斜率为-2.797，检测下限为10~2 copies/μL，与其他能引起相似临床症状的猪源病毒无交叉反应。重复性试验结果显示，组间与组内变异系数均小于1.53774%，重复性好。本方法适用于临床样品及本实验室构建的表达ASFV K205R基因的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒的鉴定及检测，对ASFV快速检测及ASF早期诊断有重要意义。
关键词：非洲猪瘟病毒(ASFV);;K205R基因;;荧光定量PCR;;检测方法
基金资助：上海市科技兴农项目(2022-02-08-00-12-F01162);; 河北省省属高等学校基本科研业务费(KY202017);; 广东省重点领域研发计划资助(2019B020211003);; 河北省重点研发计划项目(20326622D)
