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作者：刘佳晨;李丽薇;郭子强;陈金霞;曹云雷;乔思娜;刘长龙;赵冉;童光志;高飞;
单位：中国农业科学院上海兽医研究所;扬州大学江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;厦门市动物疫病预防控制中心;
摘要：本研究通过将非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的一种非结构蛋白编码基因F334L克隆至原核表达载体pCold-Ⅰ，完成重组表达质粒pCold-Ⅰ-ASFV-F334L的构建。将pCold-Ⅰ-ASFV-F334L转化受体菌感受态细胞，经1 mmol/L的IPTG诱导原核表达。SDS-PAGE和Western blot试验检测结果表明，F334L基因得到了良好的表达，将所得的F334L基因编码蛋白纯化后免疫小鼠，获得含多克隆抗体的血清。利用该抗体检测实验室构建并拯救的表达ASFV F334L基因编码蛋白的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒rPRRSV-F334L，试验结果显示该多克隆抗体具有良好的反应原性和特异性，证明了ASFV F334L基因可在PRRSV活载体中稳定表达，为ASFV活载体疫苗的研发提供了材料。
关键词：非洲猪瘟病毒;;病毒活载体;;F334L基因;;重组病毒
基金资助：国家重点研发计划课题(2021YFD1801401);; 国家自然科学基金ASFV专项(31941017);; 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(Y2020YJ15);; 上海市自然科学基金项目(21ZR1476900,21ZR1477200)
