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作者：刘清艳;王欢;丁铲;钱琨;廖瑛;方守国;
单位：长江大学动物科学学院;中国农业科学院上海兽医研究所;江苏省人兽共患病学重点实验室江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;
摘要：本研究以IBV Beaudette株基因组为模板获得N基因片段，构建重组原核表达质粒pET-32a-His-IBV-N，在大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达，纯化后获得带有His标签的N重组蛋白。将其与等体积的弗氏完全佐剂混匀乳化后免疫BALB/c小鼠3次，收集血清，得到鼠源抗N蛋白多克隆抗体。利用间接免疫荧光试验和Western blot鉴定多克隆抗体的特异性。结果显示，N蛋白多克隆抗体能特异性识别转染表达的Flag-N蛋白和IBV感染表达的N蛋白，说明此抗体能识别N蛋白的线性表位和空间表位，可应用于Western blot和间接免疫荧光实验。本研究为进一步研究N蛋白的功能和IB的诊断提供了技术支撑。
关键词：传染性支气管炎病毒;;N蛋白;;多克隆抗体
基金资助：国家自然科学基金面上项目(32172834);; 科技部十四五揭榜挂帅项目(2021YFD1801104);; 江苏省人兽共患病学重点实验室资助项目(R2007)
