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作者：纪文雯;何程;朱恩惠;王三凤;黄丽娜;陈炜;
单位：安徽中医药大学第一临床医学院;安徽中医药大学第一附属医院;
摘要：目的 探究参七虫草方对博莱霉素(bleomycin, BLM)诱导的特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis, IPF)模型大鼠成纤维细胞的影响。方法 除空白组外均采用气管内滴注BLM的方法体外分离培养模型成纤维细胞。CCK-8法检测肺成纤维细胞增殖情况，选取最佳浓度及时间进行后续实验。实验分为6组：正常成纤维细胞+正常含药血清组(A组)、模型成纤维细胞+正常含药血清组(B组)、参七虫草方最佳含药血清组(C组)、精氨酸琥珀酸盐合成酶-1(arginine succinate synthetase-1,ASS1)抑制剂组(D组)、酪氨酸激酶(tyrosine kinase, Src)/信号转导和转化激活因子3(signal transducer and transformation activator 3,STAT3)阻断剂组(E组)、MAPK/细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulatory protein kinase, ERK)通路抑制剂组(F组)。采用CCK-8法、细胞划痕实验分别检测细胞活力和迁移速率；RT-qPCR检测ASS1、Src、STAT3、双特异性蛋白激酶1/2(bispecific protein kinase 1/2,MEK1/2)、ERK1/2基因表达水平；Western Blot(WB)检测各组p-ERK、激活蛋白-1(activator-1,AP-1)、P-MEK、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)、核蛋白因子-κB p65(NF-κB p65)蛋白表达水平。结果 与A组比较，B组的细胞活力及细胞迁移速率增强和增快(P<0.05);与B组比较，其余干预组的细胞活力及细胞迁移速率减弱及降低(P<0.05)。RT-qPCR检测结果：B组与A组比较，ASS1、MEK1、MEK2、ERK1、ERK2、Src、STAT3基因表达水平升高(P<0.05)。与B组比较，其余干预组有关基因表达水平降低(P<0.05)。WB检测结果显示：B组与A组比较，p-ERK、P-MEK、MMP-2、MMP-9、NF-κB p65、AP-1蛋白表达水平升高(P<0.05)。与B组比较，其余干预组表达水平降低(P<0.05)。结论 参七虫草方能够抑制ASS1介导的Src/STAT3、MAPK/ERK级联反应，下调MMP-2、MMP-9、AP-1、NF-κBp65蛋白表达，改善IPF病情进展。
关键词：特发性肺纤维化;;成纤维细胞;;Src/STAT3;;MAPK/ERK;;MMP-2;;MMP-9;;AP-1;;NF-κBp65
基金资助：国家中医药管理局青年岐黄学者人才支持项目(国中医药人教发[2020]7号文);; 国家自然科学基金青年基金项目(81704060);; 安徽中医药大学临床科研项目(2021yfylc05);; 安徽省临床医学研究转化专项项目(202304295107020106);; 安徽省高水平传承人才支持项目(皖卫传[2023]451号)
