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作者：沈路凡;徐静;马睿玲;侯明双;吕红英;贾冠军;寇雨顺;康万荣;伊琳;
单位：甘肃中医药大学;甘肃省中医药防治慢性病疾病重点实验室;
摘要：目的:通过网络药理学和分子对接技术预测并筛选武威汉简瘀方干预高血压肾损伤的潜在分子靶点，通过动物实验分析瘀方对高血压肾损伤潜在靶点及通路表达的影响。方法:借助中药系统药理学数据库TCMSP以及PubChem获取武威汉简瘀方的有效活性成分并进行靶标转换，利用Gene Cards、OMIM数据库获取高血压肾损伤靶点；取武威汉简瘀方与高血压肾损伤交集靶点，构建交集靶点互作网络，并进行拓扑分析，得到关键靶点；运用Auto Dock软件将关键化合物与高血压肾损伤关键蛋白受体进行分子对接；对关键靶点进行GO功能分析和KEGG通路富集分析；以武威汉简瘀方颗粒剂灌胃自发性高血压大鼠(SHR),连续8 w后，检测大鼠血压、尿蛋白、肌酐、尿素氮含量；透射电镜观察大鼠肾脏组织形态改变；Western blot、RT-PCR法检测筛选得到的关键靶点以及相关信号通路蛋白的表达。结果:武威汉简瘀方的主要活性成分为槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇等，与Mdm2、Akt1、Sirt1等关键靶点对接良好，其中以槲皮素与各个靶点间的结合情况最为稳定。关键靶点主要参与调节自噬、巨噬细胞的负调控等生物过程，并富集于CellμLar senescence、PI3K、AKT、AMPK和P53等信号通路。动物实验研究结果显示，与正常对照组相比，模型对照组大鼠的血压显著升高(P<0.01),尿蛋白、尿肌酐、尿素氮含量显著升高(P<0.01),肾小球和肾小管内血管内皮的损伤加重，肾组织Mdm2、Akt1的mRNA表达上调，Sirt1mRNA表达下调(P<0.01),p-PI3K、p-AKT1和MDM2蛋白表达上调，SIRT1蛋白表达下调(P<0.01);与模型对照组相比，瘀方干预后大鼠血压明显下降(P<0.05或P<0.01),尿蛋白、尿肌酐、尿素氮含量降低(P<0.05或P<0.01),肾组织Mdm2与Akt1的mRNA表达下调，Sirt1mRNA表达上调(P<0.05或P<0.01),p-PI3K、p-AKT1和MDM2蛋白表达下调，SIRT1蛋白表达上调(P<0.05或P<0.01)。结论:武威汉简瘀方对高血压肾损伤具有一定的保护作用，可能通过上调Sirt1的表达抑制PI3K/AKT/MDM2信号通路发挥保护作用。
关键词：武威汉简瘀方;;高血压肾损伤;;网络药理学;;蛋白激酶;;磷脂酰肌醇3-激酶;;鼠双微体基因2蛋白;;沉默调节蛋白1
基金资助：国家自然科学基金资助项目(编号：82160842);; 甘肃省中医药科研项目(编号：GZKP-2022-40);; 甘肃省联合科研基金一般项目(编号：23JRRA1521)
