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作者：田艳秋;黄灵鹤;徐德宏;谭朝阳;
单位：湖南中医药大学药学院生物工程实验室;湖南丹检医药科技有限公司;
摘要：目的 以茯苓为例，建立一种适合中成药的全新分子鉴定技术——连接依赖PCR(LPCR)。方法 根据茯苓的单核苷酸多态性(SNP)位点，设计荧光探针和PCR引物。基于Ct值对检测条件进行优化，考察方法特异性，并对市售含茯苓的中成药进行检测。结果 LPCR具有良好的特异性、耐用性和灵敏度，茯苓及六味地黄制剂(丸、胶囊、滴丸、颗粒)、藿香正气制剂(水、合剂、口服液、滴丸)中均成功检测出相应条带，并且缺茯苓阴性样品对检测结果无干扰。最低10个拷贝数时，采用电泳法仍可检出茯苓。结论 LPCR可准确检测出不同剂型中成药中茯苓的特异性DNA,适用于高度降解DNA样品的检测，通用性强，可为该类制剂质量控制提供新的技术手段。
关键词：中成药;;茯苓;;连接依赖PCR(LPCR);;单核苷酸多态性(SNP);;分子鉴定
基金资助：湖南省自然科学基金面上项目(2025JJ50100,2025JJ80122);; 湖南中医药大学“十四五”重点学科——生物工程学科[校行发规字[2023]2号];湖南中医药大学研究生科研创新项目资助(2024CX181)
