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作者：刘洋;陈星;周哲旭;刘娅茹;胡啸博;陈玉龙;
单位：河南中医药大学河南省方证信号传导重点实验室;
摘要：目的 通过观察小檗碱对EC9706细胞能量代谢及相关通路的影响从而探究其机制。方法 常规培养细胞，MTT法筛药，选择15、30μg/mL两个质量浓度，通过流式细胞术检测细胞周期、凋亡水平，能量代谢分析系统检测细胞糖酵解潜能及线粒体呼吸能力，蛋白质印迹实验探究细胞中p-AMPK/AMPK及下游p-mTOR/mTOR蛋白表达水平变化，通过荧光实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)在基因水平上验证AMPK及下游mTOR的表达水平。结果 小檗碱能够明显抑制EC9706细胞增殖(P<0.01),促进EC9706细胞凋亡(P<0.05),与对照组相比，小檗碱加药组G0/G1期明显降低(P<0.05),S期占比明显升高(P<0.01)。小檗碱能够抑制EC9706细胞的糖酵解潜能及线粒体呼吸能力(P<0.01)且具有浓度依赖性。小檗碱能够促进p-AMPK/AMPK(P<0.01)并抑制p-mTOR/mTOR蛋白表达(P<0.05)。在基因水平上，小檗碱促进了AMPK表达(P<0.05),同时促进了mTOR的表达(P<0.01)。结论 小檗碱可以通过能量代谢途径抑制食管癌EC9706细胞的增殖，促进食管癌细胞凋亡并阻碍其分裂。
关键词：小檗碱;能量代谢;AMPK/mTOR通路;增殖;周期;凋亡
基金资助：国家自然科学基金面上项目(81873285,82074313,82274438)
