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作者：郭娜;王丽凤;邱雪梅;叶丽艳;杨继勇;
单位：解放军医学院;解放军总医院第一医学中心检验科;
摘要：目的 分析1株高毒力肺炎克雷伯菌(hvKp)11492外膜囊泡(OMVs)的特征。方法 选取解放军总医院第一医学中心血流分离的hvKp的1株主要克隆株hvKp11492,经基质辅助激光解吸飞行时间质谱仪和全基因组测序进行菌株鉴定。采用高速离心与聚合物沉淀相结合的方法分离纯化hvKp11492-OMVs,透射电子显微镜(TEM)和纳米颗粒追踪技术(NTA)鉴定其形态及大小，二喹啉甲酸(BCA)法及液相色谱-质谱(LC/MS)串联技术分析其蛋白组学特征，PCR技术检测其携带的毒力基因。结果 TEM观察hvKp11492-OMVs为大小不一、圆形或椭圆形、具有完整双层膜的囊泡状结构；NTA结果显示hvKp11492-OMVs平均粒径为270 nm。hvKp11492-OMVs携带的蛋白质含量为(2.448±0.975)μg/μl,亚细胞定位结果发现其包括胞浆蛋白、细胞内膜蛋白、细胞周质蛋白、细胞外膜蛋白、核区蛋白和细胞外蛋白，通过GO数据库注释发现其参与氧化还原、翻译和代谢等生物过程。其中，hvKp11492-OMVs含有GDP-L-岩藻糖合成酶、铁离子转运蛋白、铁蛋白等与致病性相关的多种蛋白质。除此之外，hvKp11492-OMVs携带iutA、iroN、iucA和rmpA毒力基因。结论 本研究鉴定了hvKp11492-OMVs的形态、大小、蛋白组学等特征，发现hvKp11492-OMVs携带多种与毒力和致病性相关的蛋白质和基因。
关键词：外膜囊泡;;高毒力肺炎克雷伯菌;;形态学;;蛋白组学;;致病性
基金资助：北京市自然科学基金资助项目(7224343)
