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作者：李家琪;柯群华;黄伟涛;任善会;姚凯慎;李苗苗;马小琴;孙跃峰;殷相平;
单位：中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室;
摘要：牛结节性皮肤病病毒（Lumpy skin disease virus, LSDV）引起的牛结节性皮肤病（Lumpy skin disease, LSD）是一种牛全身性感染疫病，对养牛产业的健康发展造成了严重威胁。本研究旨在通过构建缺失ORF143基因重组LSDV毒株，并进行其生物学特性分析，为LSDV致弱毒株的筛选及弱毒疫苗研发提供候选毒株。首先，利用同源重组技术，构建pUC19T-LSDV-ΔORF143-EGFP转移载体，再将此转移载体转染至Vero细胞并感染LSDV，利用有限稀释与单细胞亚克隆方法筛选出纯合的以增强型绿色荧光蛋白（EGFP）为标识物的ORF143基因缺失重组LSDV(rLSDV-ΔORF143-EGFP)。对该重组病毒的生长曲线、滴度和遗传稳定性等进行分析。PCR扩增与重组病毒测序结果表明该rLSDV-ΔORF143-EGFP毒株已纯化成功，且至少20代内可稳定遗传；生长曲线结果表明该重组毒株增殖能力低于野生型LSDV毒株（LSDV-WT）。本研究成功构建并纯化出重组病毒rLSDV-ΔORF143-EGFP，为LSDV弱毒疫苗研究提供候选毒株，为LSD新型疫苗研究提供理论基础。
关键词：牛结节性皮肤病病毒;;ORF143基因;;重组病毒;;生物学特性
基金资助：甘肃省联合基金项目（项目号：23JRRA1481）,题目：牛结节性皮肤病等反刍动物疫病新型疫苗研发~~
