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病毒学报2025年第04期:DNA四面体循环放大器检测TGEV方法的建立与初步应用

来源:期刊VIP网 时间:


作者:马梦瑶;赵福杰;武利恒;贾鑫浩;刘航;钱梦薇;张红垒;郑兰兰;马世杰;王松山;何曼曼;

单位:河南农业大学动物医学院;浙江华欣牧业有限公司;周口市农业技术推广中心;河南农业大学理学院;

摘要:猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)是一种猪肠道致病性冠状病毒,可引起猪的急性肠道疾病,2周龄以下哺乳仔猪死亡率达100%。本研究旨在建立一种基于催化发夹自组装(Catalytic hairpin assembly,CHA)技术的TGEV靶RNA荧光检测方法,实现对病毒核酸的快速检测。首先根据CHA反应原理,设计合成DNA四面体循环放大器(DNA tetrahedral cyclic amplifier,DTCA);利用琼脂糖凝胶电泳分析其放大检测TGEV的可行性;优化检测探针及反应条件,分析检测方法的灵敏度和特异性;利用荧光成像评价DNA四面体循环放大器在体内外对TGEV的检测。结果显示,成功合成DNA四面体循环放大器,建立了针对TGEV靶RNA的荧光CHA检测方法,具有优良的灵敏度与特异性。本研究所建立的方法通过检测反应过程中荧光强度的变化实现了对TGEV靶RNA的快速检测,为TGEV的快速检测提供了新的技术支撑。

关键词:猪传染性胃肠炎病毒;;DNA四面体循环放大器;;催化发夹自组装技术

基金资助:中国博士后科学基金(项目号:2023T160197),题目:双重激活核酸诊疗探针的癌症早期诊断与基因治疗研究;; 河南省自然科学基金(项目号:232300420014),题目:猪δ冠状病毒体外感染猪树突状细胞的分子研究~~