来源：期刊VIP网 时间：
作者：靳卫平;王文辉;郭靖;茅海燕;申硕;张严峻;
单位：浙江省疾病预防控制中心微生物检验所;浙江省公共卫生检测与病原学研究重点实验室;武汉生物制品研究所有限责任公司病毒性疫苗研究一室;
摘要：手足口病是引起手、足和口等部位出现疱疹等症状的法定丙类传染病，主要感染5岁以下的婴幼儿，部分也可感染成人。而柯萨奇病毒A组16型（Coxsackievirus A16, CVA16）是引起手足口病主要的病原体之一。本研究利用反向遗传学技术，成功构建和表达外源荧光素酶（Nano luciferase, Nluc）的CVA16报告病毒（CVA16-Nluc）。该策略是将Nluc基因插入到CVA16的VP1和2A蛋白序列中间。在蛋白水平，2A蛋白酶识别Nluc基因两侧人为添加的2A蛋白酶切位点并实现精准剪切，从而不影响病毒蛋白的表达和颗粒装配。CVA16-Nluc报告病毒可连续传代12代，并稳定高效表达外源蛋白。另外病毒基因组中Nluc基因的插入也并未影响病毒的感染性和遗传稳定性，病毒结构蛋白的表达和病毒颗粒组装。本研究建立基于CVA16-Nluc报告病毒的快速微量中和试验，可缩短实验周期，提高检测结果的准确性，可用于人源、鼠源和兔源中和单克隆抗体的筛选。CVA16-Nluc报告病毒的成功构建也将成为研究CVA16病毒复制、致病机理、和抗病毒药物等方面有用的示踪工具。
关键词：柯萨奇病毒A组16型;;反向遗传学;;报告病毒;;快速中和实验
基金资助：浙江省疾病预防控制中心自主课题（项目号：2024-B-04）,题目：柯萨奇病毒A组16型重组报告基因病毒构建及快速中和实验的建立~~
