来源：期刊VIP网 时间：
作者：尹晓萱;李东蔚;章青;王宏;孔翔羽;段招军;
单位：甘肃中医药大学公共卫生学院;传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室卫生部医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所;
摘要：在真核表达系统中构建并表达鼠伤寒沙门杆菌鞭毛蛋白（Salmonella typhimurium flagellin, FliC）和蜡样芽孢杆菌鞭毛蛋白（Bacillus cereus flagellin, BcFlg），评估其对Toll样受体5(Toll like receptor 5, TLR5)的刺激活性，为后续基于真核表达载体的鞭毛蛋白佐剂及疫苗的研究提供基础。在真核表达载体上分别插入FliC和BcFlg的编码序列，并进行去糖基化和添加信肽修饰，Western blot验证转染HEK293A细胞后分泌性表达的鞭毛蛋白。以人结肠腺癌细胞系Caco-2为模型，检测不同浓度鞭毛蛋白刺激细胞后白细胞介素-8(Interleukin-8, IL-8)分泌水平。在真核表达系统成功构建并表达FliC和BcFlg，两者均可显著诱导Caco-2细胞分泌IL-8，且呈现剂量依赖性，更重要的是，两种去糖基化鞭毛蛋白组的IL-8分泌量均优于糖基化组。基于真核表达载体构建和表达的细菌鞭毛蛋白在体外细胞模型中展现出较好的TLR5激动活性，且去糖基化修饰显著增强了活性，为进一步通过动物实验评价糖基化位点修饰与否的鞭毛蛋白作为疫苗内置佐剂的活性奠定了基础。
关键词：鞭毛蛋白;;疫苗佐剂;;真核表达载体
