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作者：邹贤群;余静;刘永杰;陈晓霞;
单位：吉林农业科技学院动物科技学院;
摘要：试验旨在探究细胞周期蛋白D1 (CCND1)基因在蛋鸡卵泡不同发育时期的时空表达模式，进一步研究CCND1基因的分子生物学作用，构建真核表达载体，并预测CCND1基因在蛋鸡卵泡发育过程中的具体分子作用。选用150日龄海兰褐蛋鸡不同大小的卵泡为试验材料，运用半定量RT-PCR、免疫组化等技术，在分子水平上进行时空表达模式研究与分析。通过酶切位点BamH I和XhoI的双酶切验证连接产物的正确性后进行测序，将测序正确的真核表达载体转染至鸡卵巢的颗粒细胞，利用实时荧光定量PCR技术对转染效果进行确认。结果显示，卵泡直径为5～6 mm和6～7 mm的CCND1的mRNA表达量显著高于其他各卵泡（P<0.05）。在前等级卵泡的卵母细胞和间质中可以观察到CCND1蛋白定位。经过菌落PCR扩增和测序分析，成功构建了真核表达载体pYr-adshuttle-4-CCND1，并将其有效转染至鸡卵泡的颗粒细胞。研究表明，试验可推测CCND1基因在蛋鸡卵泡生长发育过程中发挥一定的作用，为未来的基因功能研究和潜在应用提供了必要的分子基础和工具支持。
关键词：蛋鸡;;细胞周期蛋白D1 (CCND1);;卵泡;;真核表达载体;;时空表达
基金资助：吉林农业科技学院国家级大学生创新项目（项目编号：202311439013）
