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作者：刘新萍;周光;董优优;张泽;朱明雪;朱淇;陈昌国;
单位：解放军总医院第六医学中心检验科;解放军总医院第一医学中心检验科;
摘要：目的 探索高危型人乳头瘤病毒（HPV）16或18亚型感染后宫颈细胞中miR-196a的表达水平。方法 利用基因表达综合数据库（GEO）筛选HPV16或18亚型阳性宫颈癌细胞与正常宫颈细胞中表达差异miRNAs；利用在线生物学软件https：//kmplot.com/analysis/分析差异最大的miRNA表达情况与宫颈癌生存期的关系；收集经实时荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）基因分型检测HPV16或18亚型阳性的宫颈拭子标本作为研究对象，以同期体检人群中经qPCR基因分型检测HPV16或18亚型阴性的宫颈拭子标本作为阴性对照，采用qRT-PCR方法检测宫颈细胞中的miR-196a水平，数据处理使用2~(-△△Ct)法。结果 通过对GSE86100数据做差异分析发现miR-196a在HPV16或18亚型阳性宫颈细胞中表达降低（log_2 FC=-6.60,P<0.001）,miR-3188在HPV16或18亚型阳性宫颈细胞中表达显著增加（log_2 FC=6.22,P<0.001）；利用在线分析工具https：//kmplot.com/analysis发现miR-196a表达高的宫颈癌患者生存期较miR-196a表达低的宫颈癌患者生存期短（HR=1.87,95%CI:1.17～3.00,P=0.008），而miR-3188与宫颈癌患者生存期无相关性（HR=1.47,95%CI:0.92～2.37,P=0.110）；特异性qRT-PCR对检测结果显示HPV16阳性、HPV18亚型阳性的宫颈细胞中miR-196a表达水平为（0.93±0.09,0.51±0.07）较正常对照组（1.89±0.13）降低（P<0.05），与测序分析结果一致。结论 HPV16或18亚型感染宫颈细胞后可导致miR-196a表达降低，且miR-196a表达水平与宫颈癌患者生存期呈负相关。
关键词：微小RNA;;荧光定量逆转录聚合酶链式反应;;微小RNA-196a;;生物标志物;;生物信息学;;宫颈癌;;HPV16;;HPV18
基金资助：国家自然科学基金委员会青年科学基金资助项目（81401311）
