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中华老年心脑血管病杂志2025年第10期:微小RNA-206对脂多糖诱导的H9c2心肌细胞凋亡和炎性反应的作用

来源:期刊VIP网 时间:


作者:王学智;原涛;许振坤;高淑贤;张曼;

单位:邯郸市第一医院心内科;邯郸市第一医院心内二科;

摘要:目的 探讨微小RNA(microRNA,miR)-206对脂多糖诱导的H9c2心肌细胞凋亡和炎性反应的影响。方法利用10μg/ml脂多糖诱导H9c2细胞构建炎性损伤模型,将细胞分为对照组、脂多糖组、脂多糖1组(脂多糖+抗阴性对照)、脂多糖2组(脂多糖+抗-miR-206)、脂多糖3组(脂多糖+miR-206阴性对照)和脂多糖4组(脂多糖+miR-206模拟物)。脂多糖1组、脂多糖2组、脂多糖3组和脂多糖4组(n=3),分别使用Lipofectamine 3000试剂转染抗-阴性对照和抗-miR-206序列。细胞计数试剂盒8和5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(5-ethynyl-2′-deoxyuridine, EDU)测定细胞增殖;半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-Glo 3/7活性试剂盒检测Caspase-3/7活性,检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin, IL)-1β和IL-6水平。结果 与对照组比较,脂多糖组细胞存活率、EDU阳性细胞率明显减少,miR-206、B淋巴细胞瘤2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein, Bax)/Bcl-2、活化的Caspase-3、Caspase-3/7、TNF-α、IL-1β、IL-6、磷酸化p38、磷酸化p65表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与脂多糖组比较,脂多糖2组细胞中miR-206、Bax/Bcl-2、活化的Caspase-3、Caspase-3/7、TNF-α、IL-1β、IL-6、磷酸化p38、磷酸化p65表达明显降低,细胞存活率和EDU阳性细胞率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。脂多糖4组细胞中Caspase-3/7活性明显高于脂多糖组,差异有统计学意义(1586±58 vs 816±51,P<0.05)。结论 抑制miR-206可有效抑制脂多糖诱导的H9c2心肌细胞凋亡和炎性反应。

关键词:微RNAs;;脂多糖类;;肌细胞,心脏;;细胞凋亡

基金资助:河北省医学科学研究课题计划(20220498)