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作者：孙雪婷;郭敏;程标标;周珂雯;王艳霞;李晓东;
单位：甘肃中医药大学药学院;甘肃省中医院中药研究所;甘肃省中医药研究院,陇药大品种二次开发及临床疗效评价行业技术中心;
摘要：目的 优化甘青青兰多糖提取工艺，并评价其对刀豆蛋白A(ConA)诱导肝细胞损伤的保护作用。方法 在单因素试验基础上，以NaOH溶液体积分数、提取时间、提取温度、液料比为影响因素，总糖含量为评价指标，响应面法优化提取工艺。CCK-8法检测多糖对AML12细胞活性的影响，Hoechst染色检测细胞凋亡，JC-1染色评估线粒体膜电位，检测细胞上清液LDH、AST、ALT水平。结果 最佳条件为NaOH溶液体积分数5.52%,提取时间2 h,提取温度73℃,液料比14∶1,总糖含量为32.95%。与对照组比较，1、0.5、0.25 mg/mL多糖组细胞存活率升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较，1、0.5、0.25 mg/mL多糖组LDH、AST、ALT水平降低(P<0.05,P<0.01)。多糖干预后，凋亡细胞数减少，线粒体膜电位改善。结论 该方法稳定可靠，可提取对ConA诱导肝细胞损伤有较强保护作用的甘青青兰多糖。
关键词：甘青青兰;;多糖;;提取工艺;;响应面法;;刀豆蛋白A(ConA);;AML12细胞;;肝细胞损伤
基金资助：国家自然科学基金项目(82160818);; 甘肃省自然科学基金项目(22JR5RA622);; 兰州市科技计划项目(2025-2-146)
