来源：期刊VIP网 时间：
作者：吴祖贵;朱月;李皎;袁蓉;李俊毅;李聪聪;申震;郭英;
单位：云南中医药大学第三附属医院/昆明市中医医院;河南省洛阳正骨医院;浙江中医药大学第一附属医院;
摘要：目的 研究益气续骨合剂延缓膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨细胞衰老的作用机制。方法 SD大鼠分别灌胃给予生理盐水、益气续骨合剂(4.05、16.2 g/kg)和盐酸氨基葡萄糖(0.3 g/kg),连续给药1周后收集含药血清。将软骨细胞分为正常组、模型组、盐酸氨基葡萄糖组和益气续骨合剂低、高剂量组，给予含药血清干预。CCK8法检测软骨细胞增殖率；ELISA法检测软骨细胞IL-1β、IL-6、TNF-α水平；DCFH-DA荧光探针检测软骨细胞ROS水平；流式细胞术检测软骨细胞凋亡和细胞周期；SA-β-gal染色及γ-H2AX蛋白免疫荧光染色观察软骨细胞衰老情况；RT-qPCR、Western blot法检测软骨细胞p53、p21、CDK4、CyclinD1、CollagenⅡ、ACAN mRNA及蛋白表达。结果 与模型组比较，盐酸氨基葡萄糖组和益气续骨合剂各剂量组软骨细胞增殖率升高(P<0.01),IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低(P<0.01),ROS水平及软骨细胞凋亡率降低(P<0.01),软骨细胞G_0/G_1期比例降低(P<0.01),S期、G_2/M期比例升高(P<0.05,P<0.01),软骨细胞SA-β-gal染色阳性比例及γ-H2AX蛋白免疫荧光强度降低(P<0.01),p53、p21 mRNA及蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),CDK4、CyclinD1、CollagenⅡ、ACAN mRNA及蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论 益气续骨合剂能延缓KOA大鼠软骨细胞衰老，其作用机制可能与调控p53/p21信号通路有关。
关键词：益气续骨合剂;;膝骨关节炎;;细胞衰老;;细胞凋亡;;p53/p21信号通路
基金资助：国家自然科学基金项目(82360943);; 云南省基础研究专项(202501AU070167);; 云南省科技厅项目-中医联合专项(202101AZ070001-170,202301AZ070001-094,202301AZ070001-015);; 云南省临床医学中心科研项目(2024YNLCYXZX0293)
