来源：期刊VIP网 时间：
作者：王宇杰;王倩;徐欢欢;张宇;王蕾;赵迪;张倩;侯永清;
单位：武汉轻工大学动物营养与饲料科学湖北省重点试验室;武汉轻工大学动物营养与饲料安全湖北省协同创新中心;
摘要：本试验以7日龄仔猪作为体内试验研究对象，以猪肺泡巨噬细胞3D4/21作为体外试验研究对象，通过体内外结合的研究方法来探究葛根素（Puerarin,PR）对猪流行性腹泻病毒（Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV）感染仔猪肝脏和腓肠肌以及3D4/21巨噬细胞基因表达的影响。将30头体重均匀的7日龄仔猪随机分为Control组、PEDV组以及PEDV+PR[0.5 mg/（kg BW·d）]组。预试期3 d，正试期12 d。结果显示：PR干预回调了肝脏的OASL、ISG15、IL-6、IL-1β、TNFα、PPAR-γ、SLC27A2、APOA4、LPL、ASS1、ARG1基因（P<0.05），腓肠肌的PEDV-N、OASL、ISG15、IL-6、IL-1β基因的相对表达量（P<0.05）；体外不同浓度梯度（0、0.5、1、5、10、20μmol/L）细胞活力实验结果显示，添加5μmol/L和10μmol/L的PR对3D4/21细胞生长都有促进作用（P<0.05），其中5μmol/L对细胞促进作用最佳。将3D4/21细胞分为2个方式处理：(1) PR(5μmol/L)预处理细胞3h后加PEDV吸附，再更换为含PR(5μmol/L)培养液作用12h和24h，即全时添加；(2) PEDV吸附细胞后，更换为含PR(5μmol/L)培养液作用12h和24h，即感染后添加；每个处理组再分为Control组、PEDV组以及PEDV+PR组。结果显示：与PEDV组相比，全时添加PR下调了3D4/21细胞PEDV-N基因的相对表达量（P<0.05），感染后添加PR培养12 h上调了3D4/21细胞PEDV-N基因的相对表达量（P<0.05）；与PEDV组相比，全时添加PR下调了MX1、ISG15、IFN-β、IFITM1、IFITM3基因的相对表达量（P<0.05）；感染后添加PR均下调了MX1、ISG15、IFN-β、IFITM1、IFITM3基因的相对表达量（P<0.05）。以上结果表明，PR干预能影响仔猪肝脏的抗病毒与炎性、脂质代谢和精氨酸代谢基因的表达、腓肠肌抗病毒与炎性基因的表达；PR浓度为5μmol/L时3D4/21细胞的存活率最高；PR干预可以影响PEDV感染3D4/21细胞免疫、抗病毒与炎性相关基因的表达，可以抑制PEDV在3D4/21细胞里的复制。
关键词：葛根素;猪流行性腹泻病毒;猪肺泡巨噬细胞;肝脏;腓肠肌;仔猪
基金资助：国家重点研发计划“十四五”课题任务（2022YFD 1300403）
