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作者:赵永;杨酸;杨齐心;杨红文;王春源;吴燕;向进;付红梅;丁义杰;张依裕;
单位:贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室,贵州大学香猪研究所;贵州省畜禽遗传资源管理站;
摘要:细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)是一种调节细胞内信号通路活性的负调控因子,参与调控机体细胞的多种生理功能。为探索SOCS1基因沉默对猪乳腺上皮细胞增殖和凋亡的影响,试验通过构建猪SOCS1基因shRNA干扰载体,转染猪乳腺上皮细胞,TMT定量蛋白组学筛选差异蛋白,Annexin V/PI、CCK-8和流式细胞术检测细胞周期、细胞增殖和细胞凋亡。结果显示,干扰组(shRNA-SOCS1-138)与空白组相比,共筛选到差异表达蛋白52个,其中上调蛋白26个,下调蛋白26个。GO富集发现,差异蛋白主要富集在病毒防御响应、EB病毒遗传缺陷反应后的免疫缺陷和对其他生物的免疫反应几个方面。KEGG通路富集发现,差异蛋白主要富集在坏死性凋亡、丙型肝炎和全身性红斑狼疮信号通路。干扰SOCS1后,乳腺上皮细胞450 nm的OD值在12、24、48 h和72 h的细胞量显著或极显著高于空白组;G1期和G2期细胞占比均极显著高于空白组,S期细胞百分比极显著低于空白组;干扰组与空白组之间细胞凋亡率差异达到显著水平。综合研究结果揭示,SOCS1基因沉默可促进细胞增殖和降低细胞的凋亡,引起G1/S期阻滞,并受多个信号通路的调控作用。
关键词:SOCS1;猪乳腺上皮细胞;蛋白组学;细胞增殖;细胞凋亡
基金资助:贵州省科技计划项目(黔科合平台人才[2021]5630号); 贵州省生猪产业发展项目(黔财农[2022]183号); 国家重点研发计划子课题(2022YFD1100308-01)联合资助; 贵州省科技支撑计划(黔科合支撑[2021]一般147); 贵州省生猪产业技术体系建设(GZSZCYJSTX-03)