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作者：武梦雪;陈士玲;刘艳;米旭光;林秀英;付建华;方艳秋;
单位：吉林省人民医院生殖医学中心;
摘要：目的：探讨人脐带间充质干细胞培养上清（hUCMSCs-Sup）对米非司酮（Ms）处理的人子宫内膜基质细胞（hEndoSCs）增殖、凋亡和子宫内膜容受性的影响，并阐明其可能的作用机制。方法：体外培养hEndoSCs，分为对照组和40、60、80及100μmol·L-1 Ms组，MTT法检测各组细胞存活率。hEndoSCs分为对照组、40μmol·L-1 Ms组和60μmol·L-1 Ms组，流式细胞术检测各组细胞凋亡率，Western blotting法检测各组细胞中凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤2 (Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达水平并计算Bcl-2/Bax比值。hUCMSCs-Sup作用后，hEndoSCs分为对照组、Ms组、Ms+hUCMSCs-Sup组和Ms+hUCMSCs-Sup+3-甲基腺嘌呤（3-MA）组，MTT法检测各组细胞存活率，流式细胞术检测各组细胞凋亡率，Western blotting法检测各组细胞中微管相关蛋白1轻链3B-Ⅱ（LC3B-Ⅱ）和微管相关蛋白1轻链3B-Ⅰ（LC3B-Ⅰ）蛋白表达水平并计算LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值，实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测各组细胞中子宫内膜容受性标志分子mRNA表达水平。结果：与对照组比较，40、60、80和100μmol·L-1 Ms组细胞存活率明显降低（P<0.05），且具有时间和剂量依赖性。与对照组比较，40和60μmol·L-1 Ms组细胞凋亡率明显升高（P<0.05），细胞中Bcl-2/Bax比值明显降低（P<0.05）。hUCMSCs-Sup作用后，与对照组比较，Ms组细胞存活率和细胞中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值明显降低（P<0.05），细胞凋亡率明显升高（P<0.05），细胞中同源框基因A10 (HOXA10)、白血病抑制因子（LIF）和整合素亚基β3 (ITGB3) mRNA表达水平明显降低（P<0.05）；与Ms组比较，Ms+hUCMSCs-Sup组细胞存活率和细胞中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值明显升高（P<0.05），细胞凋亡率明显降低（P<0.05），细胞中HOXA10、LIF和ITGb3 mRNA表达水平表达明显升高（P<0.05）；与Ms+hUCMSCs-Sup组比较，Ms+hUCMSCs-Sup+3-MA组细胞存活率和细胞中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值明显降低（P<0.05）。结论：hUCMSCs-Sup可提高Ms处理后hEndoSCs的存活率，降低其凋亡率，提高子宫内膜容受性，其机制可能与hUCMSCs-Sup激活hEndoSCs自噬有关。
关键词：脐带间充质干细胞;;人子宫内膜基质细胞;;细胞凋亡;;细胞自噬;;子宫内膜容受性
基金资助：吉林省科技厅科技发展计划项目（20200801019GH,YDZJ202102CXJD076,20200403081SF,20230204036YY,20230203051SF）;; 吉林省卫健委卫生健康技术创新项目（2020J106,2020J108,2021lc059,2021lc061）
