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作者：封忠昕;李梅;
单位：贵州医科大学附属医院血液科;
摘要：目的：探讨CD40配体（CD40L）通过长链非编码RNA (lncRNA)linc00239对人单核细胞白血病THP-1细胞生物学行为的影响，阐明其可能的作用机制。方法：构建linc00239过表达载体（pcDNA-linc00239）和干扰载体（sh-linc00239），转染至THP-1细胞，采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测转染效率。THP-1细胞分为对照组、空载体（vector）组、pcDNA-linc00239组、sh-linc00239组、 vector+CD40L组、 pcDNA-linc00239+CD40L组和sh-linc00239+CD40L组。RT-qPCR法检测各组细胞中linc00239表达水平，CCK-8法检测各组细胞增殖活性，流式细胞术检测各组不同细胞周期细胞百分率和细胞凋亡率，RT-qPCR法和Western blotting法检测各组细胞中B细胞淋巴瘤2 (Bcl-2)和Bcl-2关联X蛋白（Bax） mRNA和蛋白表达水平，Western blotting法检测各组细胞中蛋白激酶B (AKT)和磷酸化AKT (p-AKT)蛋白表达水平并计算p-AKT/AKT比值。结果：与vector组比较，pcDNA-linc00239组细胞增殖活性和G_2期细胞百分率明显升高（P<0.05或P<0.01），细胞中linc00239、Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平和p-AKT/AKT比值明显升高（P<0.05或P<0.01）,G_1期细胞百分率、细胞凋亡率和细胞中Bax mRNA及蛋白表达水平明显降低（P<0.05）；与vector组比较，sh-linc00239组和vector+CD40L组细胞增殖活性和G_2期细胞百分率明显降低（P<0.05或P<0.01），细胞中linc00239、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平及p-AKT/AKT比值明显降低（P<0.05或P<0.01）,G_1期细胞百分率、细胞凋亡率和细胞中Bax mRNA及蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）。与pcDNA-linc00239组比较，pcDNA-linc00239+CD40L组细胞增殖活性和G_2期细胞百分率明显降低（P<0.05或P<0.01），细胞中linc00239、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平及p-AKT/AKT比值明显降低（P<0.05或P<0.01）,G_1期细胞百分率、细胞凋亡率和细胞中Bax mRNA及蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）；与sh-linc00239组比较，sh-linc00239+CD40L组细胞增殖活性和G_2期细胞百分率明显降低（P<0.05或P<0.01），细胞中linc00239、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平及p-AKT/AKT比值明显降低（P<0.05或P<0.01）,G_1期细胞百分率、细胞凋亡率和细胞中Bax mRNA及蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）。结论：CD40L可通过linc00239抑制THP-1细胞增殖和细胞周期进展，并诱导细胞凋亡。
关键词：CD40配体;;长链非编码RNA;;linc00239;;急性髓系白血病;;细胞周期;;细胞凋亡
基金资助：贵州省卫健委科学技术基金项目（gzwjkj2020-1-082）
