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作者：李健;李进;向姝;
单位：武警重庆总队医院卫生防疫科;陆军特色医学中心检验科;
摘要：目的 本研究旨在建立一种基于多酶恒温快速扩增技术(MIRA)检测血流感染中高毒力肺炎克雷伯菌(含有iroB基因和p-rmpA基因)的新方法。方法 根据高毒力肺炎克雷伯菌主要毒力基因iroB和p-rmpA序列设计MIRA引物组，并通过实时MIRA(Real-time MIRA)筛选最佳的引物对，建立双重Real-time MIRA检测高毒力肺炎克雷伯菌的最佳反应体系，进行交叉反应、最低检测限与临床诊断效能评价等试验。结果 在优化条件后，建立的双重Real-time MIRA方法在与其他菌株(不含iroB基因和p-rmpA基因)的交叉反应中表现良好，对高毒力的肺炎克雷伯菌(含iroB基因和p-rmpA基因)具有良好的特异性。该方法对高毒力肺炎克雷伯菌(含iroB基因和p-rmpA基因)的最低检测限为8×10~2 CFU。以实时聚合酶链反应(Real-time PCR)检测结果为金标准，评价诊断效能结果显示，该方法检测临床模拟血流感染标本的敏感度和特异性均为100.00%。结论 本研究建立了基于MIRA检测高毒力肺炎克雷伯菌的新方法，并在临床模拟血流感染标本中验证了其诊断效能。
关键词：多酶恒温快速扩增技术;;高毒力肺炎克雷伯菌;;引物设计;;检测方法
基金资助：重庆市科卫联合医学科研项目(2022QNXM034)
