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作者:胡文悦;谭凯;徐琪;韩帅娟;陈宝江;
单位:河北农业大学动物科技学院;
摘要:试验旨在制备抗耐药性大肠杆菌(E. coli)特异性卵黄抗体(IgY)与壳聚糖纳米颗粒(CN)的共轭物(IgY-CN),并评估IgY-CN的体外抑菌活性及稳定性。通过化学偶联法制备IgY-CN共轭物,采用微量肉汤稀释法测定特异性IgY的最小凝集浓度(MAC),以及CN和IgY-CN的最小抑菌浓度(MIC),测定IgY-CN的热稳定性、pH值稳定性及其在人工合成胃肠道消化液(含消化酶)中的抗菌活性及稳定性。采用透射电镜观察IgY-CN对E. coli细菌形态的影响。结果显示,特异性IgY共轭CN形成酰胺键,特异性IgY抗体效价为1∶12 000,对E. coli的MAC为128 mg/L,CN和IgY-CN对E. coli的MIC均为2 g/L。抑菌曲线显示,CN和IgY-CN均具有较强的抑菌活性。IgY-CN在不同温度(25、30、37℃)下水浴加热5、15、30 min,在不同pH值(3、7、9)条件下处理2 h后,对E. coli的MIC仍不变。在模拟胃肠道条件下,IgY-CN仍具有较强的抗菌活性,表现出耐酸性和耐酶消化活性。IgY-CN破坏了E. coli的细胞膜完整性,导致细胞质分布不均、细胞内容物泄漏,严重破坏了细菌的微观结构。研究表明,IgY-CN具有良好的抗菌活性和抗菌稳定性,具有作为新型抗菌制剂防治动物病原菌感染的潜力。
关键词:特异性IgY;;壳聚糖纳米微粒;;大肠杆菌;;抑菌活性
基金资助:河北省自然科学基金(项目编号:C2021204161);; 河北农业大学引进人才科研专项(项目编号:YJ2020005)