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作者：刘启鸿;柯丹枫;柯晓;骆云丰;胡露楠;任彦;方文怡;赵培琳;严锦贤;
单位：福建中医药大学附属第二人民医院;福建省中医脾胃临床医学研究中心;福建省医疗机构中药制剂重点实验室(福建中医药大学);
摘要：目的 通过肠菌移植(fecal microbiota transplantation, FMT)技术，进一步验证理气通便方通过调控“肠道菌群/短链脂肪酸(short chain fatty acids, SCFAs)/五羟色胺(5-hydroxytryptamine, 5-HT)”轴发挥治疗气滞证慢传输型便秘(slow transit constipation, STC)的作用。方法 将24只大鼠适应性喂养7 d后，其中3只作为正常对照组给予无菌水处理，21只大鼠用于复制气滞证STC模型(“洛哌丁胺混悬液+夹尾刺激”)造模，再进行7 d的抗生素鸡尾酒疗法脱菌处理，从中随机抽取3只处死，用于评估肠道动力情况。气滞证STC伪无菌大鼠造模成功后，将动物随机分为3组，分别为正常大鼠粪菌液移植组、气滞证STC模型大鼠粪菌液移植组、理气通便方组大鼠粪菌液移植组，每组6只。以上三组分别给予制备的相应大鼠粪便混悬液灌胃，每日1次，共1周。灌胃结束后，观察各组大鼠的一般情况、结肠组织病理变化，检测各组大鼠粪便的肠道菌群与SCFAs,运用Elisa法检测5-HT的浓度，免疫组化法检测结肠组织中5-羟色胺受体3(5-hydroxytryptamine receptor 3,5-HT3R)、5-羟色胺受体4(5-hydroxytryptamine receptor 4,5-HT4R)的表达及分布，Western Blot法检测结肠组织中色氨酸羟化酶1(tryptophan hydroxylase 1,TPH1)、色氨酸羟化酶2(tryptophan hydroxylase 2,TPH2)、五羟色胺转运体(5-hydroxytamine transporter, SERT)、单胺氧化酶-A(monoamineoxidase A,MAO-A)蛋白的表达水平。结果 理气通便方组大鼠粪菌液移植组能够显著提高粪便含水率、增加排便数量，加快肠道传输，并且能够提高血清中5-HT的浓度，提高结肠组织中5-HT3R和5-HT4R的表达，增加TPH1、TPH2、SERT、MAO-A蛋白的表达水平，并在属分类学水平上，发现毛螺菌属在移植后仍为显著差异菌。SCFAs的测定结果提示，移植理气通便方组治疗后大鼠的粪菌液可显著上调丁酸的水平，其余SCFAs未见明显变化。结论 理气通便方能够改善气滞证STC伪无菌大鼠肠道菌群结构，上调毛螺菌属的丰度，介导了SCFAs(尤其是丁酸)的产生，刺激了5-HT的合成及其受体5-HT3R和5-HT4R表达，同时也促进了5-HT的转运与代谢，从而提高了结肠传输功能，进一步验证了调控“肠道菌群/SCFAs/5-HT”轴是理气通便方治疗气滞证STC的关键环节。
关键词：慢传输型便秘;;气滞证;;肠菌移植;;肠道菌群/SCFAs/5-HT
基金资助：国家自然科学基金面上项目(82274282);; 中央引导地方科技发展资金项目(2023L3013);; 福建省自然科学基金面上项目(2021J01878);; 柯晓福建省名中医工作室建设项目(闽卫中医[2022]112号);; 福建省科技厅高校产学合作项目(2023Y4010)
