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作者：蒙琦;常亮;丁姝元;周瑶;刘盛楠;王胜明;杨明;
单位：甘肃省畜牧兽医研究所;
摘要：试验旨在探究秃疮花异紫堇碱（ICD）对脂多糖（LPS）诱导的牛肺微血管内皮细胞（CPA 47）炎症因子和Toll样受体2/髓样分化因子88/核转录因子-κB (TLR2/MYD88/NF-κB)通路的影响。选取CPA 47分为5组接种于6孔板中，每组设置4孔，对照组细胞加入1640培养基，LPS组加入脂多糖处理建立炎症模型，ICD高剂量组细胞加入20 mg/L ICD+50μg/L LPS,ICD中剂量组细胞加入15 mg/L ICD+50μg/L LPS,ICD低剂量组细胞加入10 mg/L ICD+50μg/L LPS。分别利用ELISA检测各组的炎性因子含量，实时荧光定量PCR检测TLR2/MYD88/NF-κB通路中关键基因的表达量，免疫印迹法（Western blot）检测上述通路中各蛋白含量。结果显示，与对照组相比，LPS处理组和ICD低剂量组牛肺微血管内皮细胞白细胞介素-1β (IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8 (IL-8)和肿瘤坏死因子（TNF-α）含量显著升高（P<0.05）,TLR2、NF-κB、MYD88的m RNA表达量和蛋白含量显著升高（P<0.05）。与LPS组相比，ICD高、中剂量组中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α含量显著降低（P<0.05）,TLR2、NF-κB、MYD88的mRNA表达量和蛋白含量显著降低（P<0.05）。研究表明，15～20 mg/L ICD可以有效缓解LPS诱导的牛肺微血管内皮细胞的炎症反应，抑制LPS诱导的牛肺微血管内皮细胞TLR2/MYD88/NF-κB炎症通路的激活。
关键词：秃疮花异紫堇碱;;牛肺微血管内皮细胞;;脂多糖;;炎症因子;;TLR2/NF-κB/MYD88通路
基金资助：甘肃省青年科技基金（项目编号：22JR5RA760）;; 甘肃省中央引导地方科技发展资金项目（项目编号：22ZY2QL001）
